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本方案適用紅曲及其制品、中藥材、中成藥劑、食品等不同基質(zhì)的樣品中桔青霉素的測定。

(1) 磷酸鹽緩沖溶液(PBS)：稱取8.0g氯化鈉、1.2g磷酸氫二鈉、0.2g磷酸二氫鉀、0.2glvhuajia，用水溶解，調(diào)節(jié)pH至7.0，用水定容至1000mL；

(2)0.1%吐溫20-PBS溶液(PBST)：準(zhǔn)確移取1mL吐溫20，用PBS緩沖溶液定容至1000mL；

(3)0.1%磷酸水溶液：準(zhǔn)確移取1mL磷酸加水定容至1000mL。

稱取經(jīng)充分粉碎混勻的試樣5.0g(精確至0.01g)于50mL離心管中，加入25mL提取試劑，超聲30min，再渦旋振蕩5min，4000rpm下離心5min，準(zhǔn)確移取上清液2.0mL，加38mL磷酸鹽緩沖溶液(PBS)溶液稀釋并混勻，待凈化。

ProElut^® CIT IAC 3mL 20/pk (Cat.#: 67128)

(1)活化：將50mL注射器連接于免疫親和柱上端，棄去保護(hù)液；

(2)上樣：全部上樣液以1-2滴/s的流速通過免疫親和柱，棄去流出液；

(3)淋洗：加入10mL PBST溶液淋洗柱子，棄去全部流出液與柱管中水分；

(4)洗脫：加入1.0mL甲醇進(jìn)行洗脫，流速為1-2滴/s，收集全部洗脫液于玻璃試管中，待檢測。

色譜柱：Diamonsil^® C18(2), 150x4.6mm, 5μm (Cat.#: 99601)

流速：1.0mL/min

進(jìn)樣量：20μL

柱溫：30℃

檢測器：激發(fā)波長350nm, 發(fā)射波長500nm

流動(dòng)相：乙腈:0.1%磷酸水溶液=40:60