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快速分析柱的制備和操作及主要構(gòu)造

更新日期：2021-06-27 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：1876

　　快速分析柱制備和操作快速柱色譜：

　　1）確定干燥、不含溶劑的待分離混合物的重量。

　　2）用薄層色譜選取溶劑體系，使Rf的值處于0.2～0.3之間，但如果混合物復雜，這可能不現(xiàn)實。在比較復雜的情況下，可能需要借助梯度洗脫的方式，簡單地說，就是在純化洗脫的過程中不斷提高溶劑的極性，該技術(shù)在后面有更加詳盡的介紹。但是在薄層色譜分析中，你必需確定哪種溶劑體系將會使不同的點樣處于Rf在0.2～0.3的范圍之內(nèi)。

　　3）確定用于樣品上柱的方法。你可有三種選擇：凈試樣法，溶液法或硅膠吸附法。

　　快速分析柱的構(gòu)造：

　　由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。

　　使用：

　　色譜柱在使用前，進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。

　　要求流動相具備以下的特點：

　　流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。

　　流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學反應(特殊情況除外)。

　　流動相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果；同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。

　　流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。

　　流動相沸點不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實驗無法進行。

　　在流動相配制好后，一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

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